Ошибки при определении групп крови и их предупреждение

Ошибки при определении групп крови

Регистрационные удостоверения

Разновидности ошибок при определении групп крови: технические, вызванные применением некачественных реагентов, обусловленные биологическими особенностями анализируемых образцов.

Технические причины

  1. Некорректное расположение реагентов на планшете.
  2. Нарушение количественного отношения цоликлонов и эритроцитов.
  3. Недостаточная стерильность планшетов и пипеток.
  4. Неверная запись в историю болезни.
  5. Несоблюдение времени реакции агглютинации. В случае ожидания менее 5 минут реакция может не наступить при наличии слабых агглютиногенов. При передержанной реакции подсыхание капель с краев может симулировать ложноположительный результат.
  6. Температура воздуха свыше 25 °C. Рекомендуется использовать специальные реагенты с поправкой на температурные условия, опускать внешнюю часть планшета в холодную воду.
  7. Недостаточное или избыточное центрифугирование. В первом случае возможны ложноположительные результаты, во втором – ложноотрицательные.

Низкое качество реагентов

  1. Титр цоликлонов менее 1:32, использование просроченных реагентов вызывают позднюю или слабо выраженную реакцию.
  2. Загрязнение и недостаточная консервация цоликлонов и стандартных эритроцитов вызывает «бактериальную» агглютинацию.

Биологические особенности эритроцитов

  1. Слабые формы антигенов эритроцитов вызывают позднюю и слабо выраженную агглютинацию. Во избежание ошибок определения групп крови осуществляют повторное исследование с другой серией цоликлонов и увеличенным временем реакции, применяют моноклональные антитела Анти-Aсл., проводят типирование перекрестным способом со стандартными эритроцитами.
  2. «Панагглютинация» вызывает неспецифическую агглютинацию со всеми сыворотками. Онкологические и гематологические пациенты попадают в группу риска. Для устранения «аутоагглютинации» используют трехкратное отмывание эритроцитов. Планшет прогревают в течение 5 минут в термостате при 37 °C. В ряде случаев предварительно подогревают пробирку, реактивы, раствор NaCl.
  3. «Монетные столбики» эритроцитов. По окончании исследования в поле реакции рекомендуется добавить 1 – 2 капли 0,9 % раствора NaCl и покачать планшет.
  4. Неполная агглютинация. Частичная агглютинация эритроцитов может возникать после пересадки пациенту костного мозга или в первые месяцы после трансфузии крови 0(I). Для окончательного типирования антигенов по системам AB0 и Резус рекомендуется использование ID-гелевых карт.

Биологические особенности антител

  1. Выявление иммунных антител, возникших в результате предшествующей сенсибилизации. Больному с иммунными антителами требуется индивидуальный подбор донора.
  2. Возникновение «монетных столбиков». Сомнительный результат подтверждают со стандартными эритроцитами 0(I). Для распознавания истинной агглютинации добавляют изотонический раствор и покачивают планшет.
  3. Отсутствие Анти-A и Анти-B-антител. Встречается у младенцев и больных с угнетением гуморального иммунитета.
  4. Присутствие в сыворотке специфических и неспецифических холодовых антител. В случае наличия неспецифических агглютининов агглютинация пропадает во время проведения исследования при 37 °C. Взаимодействие сыворотки со стандартными эритроцитами 0(I) говорит о присутствии специфических холодовых антител. Специфичность антител определяется с помощью типированных по системам P и MNS эритроцитов.

Список литературы

  • Рагимов, А.А. Трансфузионная иммунология/А.А. Рагимов, Н.Г. Дашкова. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — 279 с.
  • Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови/Ю.Л. Шевченко, Е.Б. Жибурт. — СПб.: Питер, 2000. — 308 с.

Патенты

Галерея 1

Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов

Регистрационное удостоверение на медицинское изделие. ТУ 22.29.29−001−06125010−2017. № РЗН 2018/6730 от 02 марта 2020 года

Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов

Приложение к регистрационному удостоверению на медицинское изделие. ТУ 22.29.29−001−06125010−2017. № РЗН 2018/6730 от 02 марта 2020 года

Набор реагентов для изосерологических исследований in vitro (Иммуногем-Сангвитест)

Регистрационное удостоверение на медицинское изделие. ТУ 21.20.23-002-06125010-2018. № РЗН 2019/8361 от 02 марта 2020 года

Набор реагентов для изосерологических исследований in vitro (Иммуногем-Сангвитест)

Приложение к регистрационному удостоверению на медицинское изделие. ТУ 21.20.23-002-06125010-2018. № РЗН 2019/8361 от 02 марта 2020 года

Галерея 2

Патент на промышленный образец 105908

Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Патентообладатель, автор: Чмелев Вадим Мстиславович, генеральный директор ООО

Патент на промышленный образец 109688

Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Патентообладатель, автор: Чмелев Вадим Мстиславович

Патент на промышленный образец 109689

Планшет для типирования крови человека по антигенам эритроцитов. Патентообладатель, автор: Чмелев Вадим Мстиславович

Ошибки при определении группы крови,
Rh принадлежности и проведении проб на
индивидуальную совместимость возникают
при нарушении техники выполнения
исследования или в случаях трудноопределимых
групп крови.

5.1. Технические ошибки.

5.1.1. Ошибочный порядок расположения
реагентов. При правильной оценке
результата в каждом отдельно взятом
реагенте можно сделать неправильное
заключение о группе крови и резус —
принадлежности, если нарушен порядок
расположения реагентов в штативе или
на пластинке. Поэтому каждый раз при
определении группы крови следует
проверить расположение реагентов, а
также визуально оценить их качество,
исключить использование помутневших,
частично высохших реагентов, реагентов
с истекшим сроком годности.

5.1.2. Температурные условия. Определение
группы крови производят при температуре
не ниже 15 град. С,поскольку исследуемая
кровь может содержать поливалентные
холодовые агглютинины, вызывающие
неспецифическое склеивание эритроцитов
при пониженной температуре. Видимость
агглютинации может создавать образование
«монетных столбиков». Неспецифическая
агрегация эритроцитов, как правило,
распадается после добавления 1-2 капель
физиологического раствора и покачивания
пластинки.

При повышенной температуре анти-А,
анти-В, анти-АВ антитела утрачивают
активность, поэтому определение группы
крови производят при температуре не
выше 25 град. С.

5.1.3. Соотношение реагентов и исследуемых
эритроцитов.

Оптимальное для реакции агглютинации
соотношение эритроцитов и тестовых
реагентов — 1:10 при использовании
гемагглютинирующих сывороток, 2-3:10 при
использовании моноклональных реагентов
(цоликлонов) и реагентов, приготовленных
в комбинации с коллоидами.

При значительном избытке эритроцитов
агглютинация может быть не замечена,
особенно в тех случаях, когда
агглютинационные свойства эритроцитов
снижены — подгруппа A2. При недостаточном
количестве эритроцитов агглютинация
медленно появляется, что также может
привести к неправильной трактовке
результатов в случае исследования
эритроцитов со слабой агглютинабельностью.

5.1.4. Продолжительность наблюдения.
Агглютинация эритроцитов появляется
в течение первых 10 с., однако наблюдение
за ходом реакции следует проводить не
менее 5 мин., особенно внимательно
наблюдая те капли, в которых агглютинация
не появилась. Это позволяет выявить
слабый агглютиноген А2, характеризующийся
замедленной агглютинацией.

5.2. Трудноопределимые группы крови.

5.2.1. Подгруппы крови. Антиген А,
содержащийся в эритроцитах группы А(II)
и AB(IV), может быть представлен двумя
вариантами (подгруппами) — А1 и А2. Антиген
В таких различий не имеет. Эритроциты
A2 отличаются от эритроцитов A1 низкой
агглютинационной способностью по
отношению к антителам анти-А. Подгруппы
крови в клинической трансфузиологии
значения не имеют, поэтому при переливании
эритроцитов их не учитывают. Лицам,
имеющим антиген А2, можно переливать
эритроциты А1; лицам, имеющим антиген
А1, можно переливать эритроциты А2.
Исключение составляют реципиенты,
имеющие экстраагглютинины альфа1 и
альфа2. Эти антитела не вызывают
посттрансфузионных осложнений, однако
проявляют себя в пробе на индивидуальную
совместимость. В частности, сыворотка
реципиента А2альфа1 агглютинирует
эритроциты А1 на плоскости или в пробирках
при комнатной температуре, поэтому
реципиентам A2альфа1(II) переливают
эритроциты 0(I), реципиентам A2Вальфа1(IV)
переливают эритроциты В(III) или 0(I).

5.2.2. Неспецифическая агглютинация
эритроцитов. О ней судят на основании
способности эритроцитов агглютинироваться
сыворотками всех групп, включая AB(IV).
Неспецифическая агглютинация наблюдается
при аутоиммунной гемолитической анемии
и других аутоиммунных заболеваниях,
сопровождающихся адсорбцией аутоантител
на эритроцитах, при гемолитической
болезни новорожденных, эритроциты
которых нагружены аллоантителами
матери.

Неспецифическую агглютинацию трудно
отличить от специфической. Поэтому при
наличии агглютинации эритроцитов с
реагентами анти-А, анти-В, анти-АВ, анти-D
необходимо провести пробу со стандартной
сывороткой AB(IV) и физиологическим
раствором. В противном случае реципиент
может быть ошибочно отнесен к группе
AB(IV) резус положительный, что повлечет
за собой неправильный выбор донора.

Если из-за неспецифической агглютинации
эритроцитов группу крови больного
установить не удается, заключение о
групповой принадлежности крови не
выдают, образец крови направляют в
специализированную лабораторию. При
наличии жизненных показаний больному
переливают эритроциты группы 0(I).

5.2.3. Кровяные химеры. Кровяными химерами
называют одновременное пребывание в
кровяном русле двух популяций эритроцитов,
отличающихся по группе крови и другим
антигенам. Трансфузионные химеры
возникают в результате многократного
переливания эритроцитной массы или
взвеси группы 0(I) реципиентам другой
группы. Истинные химеры встречаются у
гетерозиготных близнецов, а также после
пересадки аллогенного костного мозга.

Установление группы крови при кровяных
химерах затруднено, поскольку в некоторых
случаях половина эритроцитов, циркулирующих
в кровяном русле, имеет одну группу
крови, а другая половина — другую.

Реципиенту, имеющему кровяную химеру,
переливают эритроцитную массу или
взвесь, не содержащие антигены, по
отношению к которым у реципиента могут
быть антитела.

5.2.4. Другие особенности. Определение
группы крови АВ0 и резус — принадлежности
может быть затруднено у больных в связи
с изменением свойств эритроцитов при
различных патологических состояниях.
Это может выразиться в повышенной
агглютинабельности эритроцитов,
наблюдаемой у больных циррозом печени,
при ожогах, сепсисе. Агглютинабельность
может быть столь высока, что эритроциты
склеиваются в собственной сыворотке и
физиологическом растворе. При лейкозах
наблюдается снижение агглютинабельности
эритроцитов, в результате чего значительное
их количество остается не вовлеченным
в агглютинацию даже при использовании
высокоактивных стандартных реагентов
(ложная кровяная химера).

У некоторых новорожденных, в отличие
от взрослых людей, антигены А и В на
эритроцитах выражены слабо, а
соответствующие агглютинины в сыворотке
крови отсутствуют.

Во всех случаях нечеткого, сомнительного
результата необходимо повторить
исследование, используя дополнительно
стандартные реагенты другой серии. Если
результаты остаются неясными, образец
крови направляют на исследование в
специализированную лабораторию.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

  • #
  • #
  • #
  • #

    13.05.20153.34 Mб23Osmos.doc

  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #
  • #

Библиографическое описание:


Тактаева, Е. В. Группа крови человека и проблемы при ее определении / Е. В. Тактаева. — Текст : непосредственный // Молодой ученый. — 2019. — № 2 (240). — С. 64-66. — URL: https://moluch.ru/archive/240/55598/ (дата обращения: 22.09.2023).



Группа крови — это генетически наследуемые признаки, не меняются в течение жизни в естественных условиях и описание индивидуальных антигенных характеристик эритроцитов, которые определяют с помощью методов идентификации специфических групп углеводов и белков, помещенных в мембраны эритроцитов человека или животного. Группа крови также характеризует системы эритроцитарных антигенов, или агглютиногенов (веществ, которые организм человека рассматривает как чужеродные, потенциально опасные, против которых начинает производить собственные антитела, см. агглютиноген), которые контролируются определенными локусами (конкретный участок в хромосоме), содержащие различное количество аллельных (варианты последовательности нуклеотидов ДНК в локусе) генов, таких, например., как A, B и 0 системе AB0. Наличие у людей разных Группа крови обусловлена ​​генетическими факторами, которые содержатся в длинном плече 9-й хромосомы.

К началу 20-го века никто и не подозревал, что кровь может быть разной. Переворот в этой области знаний сделал австрийский врач Карл Ландштейнер, который обнаружил и исследовал три антигены А, В и С. В 1901 году он поставил необычный эксперимент: он принимал сыворотки крови одних людей и смешивал с эритроцитами других, а именно взяв кровь себе и пяти своих сотрудников, отделив сыворотку от эритроцитов с помощью центрифуги и смешал отдельные образцы эритроцитов с сывороткой крови разных лиц и собственной. Некоторые сыворотки склеивали эритроциты, а некоторые — нет. И в зависимости от наличия или отсутствия этой реакции (агглютинации) были обнаружены группы крови.

В совместной работе с Л. Янским по наличию или отсутствию агглютинации Ландштейнер разделил все образцы крови на три группы: А, В и 0. Два года спустя ученики Ландштейнера, А. Штурли и А. Декастелло, открыли четвертую группу крови — АВ. Общепринятым является буквенно-цифровое обозначение Группы крови: первая — 0 (I), вторая группа — А (II), третья группа — В (iii), четвертая группа — АВ (IV). В среднеевропейской популяции по системе AB0 около 43 % людей имеют первую группу крови, 42 % — вторую, 11 % — третьего и около 4 % — четвертую. Группа крови по системе АВ0 отличают по наличию антигенов (агглютиногенов) на эритроцитах и ​​антител (агглютининов) в сыворотке крови (табл. 1).

Эритроцит может обладать только антигеном А (II группа крови), только антигеном В (III группы крови) или и А, и В одновременно (IV группа крови). Если же на поверхности эритроцитов нет ни одного из этих антигенов, значит, он относится к клеткам I (0) группы крови.

Кровь всегда готова к тому, что у нее могут попасть посторонние эритроциты. Если у человека есть антиген А (II группа крови), то в плазме обязательно присутствуют антитела бета. Как только в организм попадает эритроцит, что несет на себе антиген В, антитела тут же прилепятся чужака, как метка. Это передаст иммунной системе сигнал об опасности. У обладателей антигена В (III группы крови) функцию антитела играют альфа распознают эритроциты с А-антигеном.

Таблица 1

Основные факторы, обусловливающие групповую принадлежность крови по системе АВ0

Группа крови

Антигены (агглютиногены)

Антитела (агглютинины)

І

0

α та β

ІІ

А

β

ІІІ

В

α

ІV

АВ

Отсутствуют

Антигены системы АВО развиваются на эритроцитах еще до рождения ребенка. Например, антиген А находится на эритроцитах 37 дневного плода. Но полное развитие антиген получает после рождения, через несколько месяцев. У взрослых людей кроме антигенов А, В еще имеется антиген Н. Он предшественник антигенов А, В, но может быть и на поверхности эритроцитов первой группы.

В 1911 г обнаружены две подгруппы антигена А, а именно А1 и А2. Между собой они могут отличаться как качественно, так и количественно. Качественно — это особенности в биохимической структуре сахаров. А количественно — это большее количество детерминант в антигене А1. Поэтому факту определены подгруппы А2 и А2В.

Распознать А2 подгруппу можно по сильной активности взаимодействия анти-Н с А2 клетками чем с А1.

Для клинической практики наибольшее значение имеют две классификации Группа крови человека: система AB0 и резус-система (Rhesus) — вследствие того, что эти системы обладают наибольшей антигенной силой. При каждом переливании крови от человека к человеку обязательно учитывают совместимость именно с этими двумя системами, поскольку в случае переливания человеку другой (несовместимой) группы крови происходит агглютинация (склеивание) и гемолиз (разрушение) эритроцитов, что может привести смерти.

Наследование различных групп крови АВО-системы определяется различным сочетанием трех аллелей одной аллеломорфных группы генов, которые обозначаются как JA, β и I ‘и расположены в девять паре хромосом.

Аллель JA определяет образование антигена А на поверхности эритроцитов и агглютинина β в плазме крови, аллель JB — образование антигена В на эритроцитах и агглютинина α в плазме и, в конце концов, за аллеля J отсутствуют антигены А, В на поверхности эритроцитов и содержатся агглютинины α и β в плазме.

Генетические исследования показали, что в этой системе существуют следующие соотношения между генотипом и его фенотипическим проявлением:

‒ генотипы JAJA и JAJ0 дают одинаковый фенотип А с антигеном А и агглютининов β;

‒ генотипы JBJB и JBJ ° обусловливают одинаковый фенотип В с антигеном В и агглютининов α;

‒ генотип JAJB определяет фенотип АВ с антигенами А и В, но без агглютининов α и β;

‒ генотип J ° J ° вызывает фенотип 0 без антигенов А и В, но с агглютининами α и β.

Гены JA и JB в отношении гена J ° ведут себя доминантно.

Группы крови человека можно определить стандартными эритроцитами, цоликлонами (моноклональные антитела) как на плоскости, так и гелевыми технологиями. При определении могут возникнуть ошибки. Технические (например, неправильная маркировка крови и реагентов, неправильное соотношение, срок годности и т. д.), невысокое качество реактивов. Но самое важное это ошибки, обусловленные индивидуальными особенностями антигенов эритроцитов АВО. Поскольку антигены имеют сложную химическую структуру — гликолипиды, гликопротеины, гликозидные остатки, прикрепленные к олигосахаридным цепочкам. Даже сами олигосахаридные цепочки различны у антигенов А и В. Поэтому важно применять широкий спектр антител для определения антигенов. Количество детерминант на эритроцитах различное. При большом их количестве реакция агглютинации сильнее. Окружающая среда может влиять на модификацию антигенов. Детерминанты ослабевают или утрачиваются у онкологически больных людей, лейкозами. Эти изменения мало изучены. Они играют роль в нарушении синтеза трансфераз, ответственных за формирование антигенных детерминант А и В. Так же изменения имеют место при вирусной и бактериальной природе. При таких случаях возможно приобретение, например, В -подобного антигена. Он образуется вследствие влияния микроорганизмов взамен антигена А на мембране эритроцитов. Микроорганизмы выделяют ацетилазы, которые воздействуют на антиген А и последний становится похожим на антиген В. И что интересно, приобретенный антиген В не агглютинирует собственными анти-В антителами. Часто ошибки происходят при не выявлении антигена А2 в группе крови А или в группе крови А2В. Существуют ошибки, связанные со специфической и неспецифической агглютинацией. Это может связано наличием аутоантител как на эритроцитах, так и в сыворотке аллоантител.

Литература:

  1. Лавряшина М. Б., Толочко Т. А., Волков А. Н. Аллоантигены крови человека: Учеб. пособ. — Кемерово, 2006; Практическая трансфузиология / Под ред. Г. И. Козинке. — М., 2005.
  2. Википедия — статья «Группа крови».
  3. Минеева Н. В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. Санкт-Петербург 2010 г. Издание 2-е.

Основные термины (генерируются автоматически): группа крови, антиген А, эритроцит, III, поверхность эритроцитов, агглютинин, антиген, антиген В, система, сыворотка крови.

Понравилась статья? Поделить с друзьями:
  • Ошибки при определении высоты прикуса
  • Ошибки при отгрузке товара со склада
  • Ошибки при осмотре места происшествия дтп
  • Ошибки при отборе проб нефтепродуктов
  • Ошибки при определении билирубина